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目的:探讨转录因子固醇调节元件结合蛋白( SREBP1c)及其活性形式( SREBP1cm)对人蛋白激酶R样内质网激酶( PERK)的调控作用。方法构建人PERK启动子截短体报告基因载体,与内参质粒pRL-SV40共转入人胚肾细胞HEK293检测荧光素酶活性;用pcDNA3.1(-)-SREBP1c、pcDNA3.1(-)-SREBP1cm与PERK启动子转录活性核心区域共转293T细胞,双荧光素酶报告基因分析SREBP1c及活性形式SREBP1cm对PERK启动子转录活性的调控;RT-PCR和免疫印迹法检测SREBP1c、SREBP1cm对PERK mRNA和蛋白表达的影响。结果成功构建PERK启动子截短体报告基因载体,确定了PERK启动子转录活性核心区域;双荧光素酶报告基因分析结果显示SREBP1c抑制PERK启动子的转录活性,而SREBP1cm促进PERK启动子的转录活性。 SREBP1c抑制PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05),SREBP1cm促进PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 SREBP1c和SREBP1cm对PERK启动子转录活性及其表达具有相反的调控作用。

作者:胡勤;毛雨;陆嘉陵;谢巍伟;郑维;郭风劲

来源:基础医学与临床 2017 年 37卷 2期

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作者:
胡勤;毛雨;陆嘉陵;谢巍伟;郑维;郭风劲
来源:
基础医学与临床 2017 年 37卷 2期
标签:
蛋白激酶R样内质网激酶 固醇调节元件结合蛋白1c 转录活性 脂代谢与内质网应激 PERK SREBP1c transcriptional activity lipid metabolism and ERs
目的:探讨转录因子固醇调节元件结合蛋白( SREBP1c)及其活性形式( SREBP1cm)对人蛋白激酶R样内质网激酶( PERK)的调控作用。方法构建人PERK启动子截短体报告基因载体,与内参质粒pRL-SV40共转入人胚肾细胞HEK293检测荧光素酶活性;用pcDNA3.1(-)-SREBP1c、pcDNA3.1(-)-SREBP1cm与PERK启动子转录活性核心区域共转293T细胞,双荧光素酶报告基因分析SREBP1c及活性形式SREBP1cm对PERK启动子转录活性的调控;RT-PCR和免疫印迹法检测SREBP1c、SREBP1cm对PERK mRNA和蛋白表达的影响。结果成功构建PERK启动子截短体报告基因载体,确定了PERK启动子转录活性核心区域;双荧光素酶报告基因分析结果显示SREBP1c抑制PERK启动子的转录活性,而SREBP1cm促进PERK启动子的转录活性。 SREBP1c抑制PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05),SREBP1cm促进PERK mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论 SREBP1c和SREBP1cm对PERK启动子转录活性及其表达具有相反的调控作用。