目的探索长链非编码RNA表达质粒构建的方法,研究lncRNA-1700020I14Rik对肾系膜细胞纤维化的影响.方法从小鼠肾系膜细胞中提取RNA并反转录为cDNA作为模板,PCR法扩增目的片段,构建入载体pcDNA3.1(+)中.通过脂质体3000转染方法,将载体转染至高低糖培养的小鼠肾系膜细胞中.RT-qPCR法检测1700020I14Rik的表达水平;Western blot检测肾脏纤维化标记蛋白Col-4、FN及TGF-β1表达水平.结果1700020I14Rik在高糖培养的肾系膜细胞中显著性下调(P< 0.01).与转染空质粒组相比,转染表达质粒的肾系膜细胞中1700020I14Rik表达水平升高(P< 0.01),且促使Col-4、FN以及TGF-β的表达水平下降(P< 0.05).结论pcDNA3.1(+)-1700020I14Rik表达质粒能高表达1700020I14Rik,长链非编码RNA-1700020I14Rik可以缓解高糖培养下肾系膜细胞的纤维化发展.
作者：李爱玲；彭睿；孙艳；彭惠民；易红；张政
来源：基础医学与临床 2017 年 37卷 6期
