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目的 探究尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)的表达对高侵袭性人膀胱癌细胞系T24体外增殖与侵袭的影响,以及哺乳动物靶向雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)可能的作用.方法 设计合成针对uPAR、Rictor、PTEN基因的siRNA和阴性对照NC siRNA.将对数增殖期T24细胞随机分为5组,并设为实验组siuPAR、siRictor、siRictor+siuPAR、siuPAR+siPTEN和对照组NC.用瞬时转染法将以上siRNA及相应组合分别转入5组T24细胞;分别用RT-qPCR和Western blot检测mRNA及蛋白的表达;用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测uPAR siRNA对T24细胞增殖及侵袭的影响.结果 T24细胞中uPAR mRNA和蛋白的表达量显著上调(P<0.05).沉默uPAR能够显著下调T24细胞中磷酸化Akt Serine-473(P-Akt S473)的表达量(P<0.05),并抑制T24细胞的迁移与侵袭(P<0.05).敲除PTEN基因的T24细胞中,沉默uPAR基因促进Akt S473磷酸化(P<0.05).结论 沉默uPAR能够抑制T24细胞的迁移与侵袭,在T24细胞中uPAR可能是mTORC2的上游调控因子.

作者:韩俊岭;陈昆;郭亮;马曜辉;韩前河;单中杰;宋东奎

来源:基础医学与临床 2019 年 39卷 11期

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韩俊岭;陈昆;郭亮;马曜辉;韩前河;单中杰;宋东奎
来源:
基础医学与临床 2019 年 39卷 11期
标签:
膀胱癌细胞系T24 迁移 侵袭 uPAR mTORC2
目的 探究尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)的表达对高侵袭性人膀胱癌细胞系T24体外增殖与侵袭的影响,以及哺乳动物靶向雷帕霉素靶蛋白复合物2(mTORC2)可能的作用.方法 设计合成针对uPAR、Rictor、PTEN基因的siRNA和阴性对照NC siRNA.将对数增殖期T24细胞随机分为5组,并设为实验组siuPAR、siRictor、siRictor+siuPAR、siuPAR+siPTEN和对照组NC.用瞬时转染法将以上siRNA及相应组合分别转入5组T24细胞;分别用RT-qPCR和Western blot检测mRNA及蛋白的表达;用MTT法和Transwell侵袭实验分别检测uPAR siRNA对T24细胞增殖及侵袭的影响.结果 T24细胞中uPAR mRNA和蛋白的表达量显著上调(P<0.05).沉默uPAR能够显著下调T24细胞中磷酸化Akt Serine-473(P-Akt S473)的表达量(P<0.05),并抑制T24细胞的迁移与侵袭(P<0.05).敲除PTEN基因的T24细胞中,沉默uPAR基因促进Akt S473磷酸化(P<0.05).结论 沉默uPAR能够抑制T24细胞的迁移与侵袭,在T24细胞中uPAR可能是mTORC2的上游调控因子.