目的研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对体外培养的骨骼肌肌管内长寿命蛋白降解的影响及其可能的作用机制.方法通过无菌分离Wistar大鼠(2日龄)下肢肌肉,组织块培养法增殖、传代纯化成肌细胞,融合形成肌管,使用L--酪氨酸标记肌管蛋白后,随机分成四组:对照组和TNF组分别应用不含TNF和含有TNF-α(2 000U/mL)的培养液培养肌管12、24、36和48h.MG132组和TNF + MG132组则分别使用含蛋白酶体抑制剂MG132(50μmol/L)或含有MG132(50μmol/L)+TNF-α(2 000U/mL)的培养液培养肌管24h.应用液体闪烁计数仪测定培养液和细胞内L--酪氨酸的含量,计算肌管长寿命蛋白的降解率.结果长寿命蛋白降解率TNF组各时间点均较对照组显著增加(P＜0.01),MG132组较对照组显著降低(P＜0.01),TNF + MG132组显著低于TNF组,差异有显著性意义(P＜0.01).结论泛素-蛋白酶体途径是骨骼肌肌管长寿命蛋白的重要降解途径之一;TNF-α能作用于骨骼肌肌管,增强蛋白降解率;泛素蛋白酶途径是TNF-α增强骨骼肌蛋白降解的主要途径之一.
作者：申传安；柴家科；盛志勇；蒋金珩
来源：解放军医学杂志 2003 年 28卷 11期
