目的包装负载人肝素酶(hpa)全长cDNA的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-hpa).方法将肝素酶正义腺病毒穿梭质粒pDC315-hpa与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装Ad-hpa,并大量扩增,收集纯化.对纯化后的Ad-hpa进行滴度测定、感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定.结果包装成功的腺病毒载体具有良好的感染性,纯化浓缩后的病毒滴度可达5×1010pfu/ml.电镜证实病毒浓缩液中存在病毒颗粒,并可见病毒在HEK293细胞中复制.PCR双引物鉴定Ad-hpa可扩增出Ad及hpa特异片段,而对照则不能扩增出hpa片段.结论成功包装了负盘.
作者：陈陵；蔡永国；郑兴春；杨仕明；房殿春；罗元辉；王东旭
来源：解放军医学杂志 2006 年 31卷 1期
