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目的 建立同时检测1~4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、森林脑炎病毒和黄热病病毒等5种虫媒病毒的悬浮芯片检测方法.方法 根据GenBank发表的上述病毒的序列,通过生物信息学分析和参考相关文献,在黄病毒属高度保守的NS5区设计属通用引物和种特异检测探针.将探针共价交联到不同的Luminex色标微球上,利用属通用引物进行RT-PCR扩增,与混合微球杂交,最后利用Luminex200仪器分析荧光强度值.结果 将平均荧光强度的判定阈值定为背景对照的两倍可以对这5种共8型病毒进行有效鉴定.通过多批次的实验,均能准确鉴定出上述5种病毒,没有出现交叉反应,且批次间的平均荧光值偏离不大,变异系数(CV)均小于8

作者:罗渊;刘伯华;杨保安;张永国;李靖;战大伟;夏玉坤;祝庆余

来源:解放军医学杂志 2008 年 33卷 6期

知识库介绍

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罗渊;刘伯华;杨保安;张永国;李靖;战大伟;夏玉坤;祝庆余
来源:
解放军医学杂志 2008 年 33卷 6期
标签:
虫媒病毒 悬浮芯片 检测
目的 建立同时检测1~4型登革病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、森林脑炎病毒和黄热病病毒等5种虫媒病毒的悬浮芯片检测方法.方法 根据GenBank发表的上述病毒的序列,通过生物信息学分析和参考相关文献,在黄病毒属高度保守的NS5区设计属通用引物和种特异检测探针.将探针共价交联到不同的Luminex色标微球上,利用属通用引物进行RT-PCR扩增,与混合微球杂交,最后利用Luminex200仪器分析荧光强度值.结果 将平均荧光强度的判定阈值定为背景对照的两倍可以对这5种共8型病毒进行有效鉴定.通过多批次的实验,均能准确鉴定出上述5种病毒,没有出现交叉反应,且批次间的平均荧光值偏离不大,变异系数(CV)均小于8