目的 探讨脑源性神经营养因子前体(proBDNF)对小鼠海马神经元存活和突起生长的影响,以及p75神经营养素受体(p75NTR)在其中的介导作用.方法 取p75NTR转基因18日龄胎鼠(野生型p75NTR+/+,基因敲除型p75NTR-/-)海马组织,进行新生海马神经元原代培养.p75NTR+/+基因型神经元设对照组、proBDNF(30ng/ml)组和proBDNF(30ng/ml)+p75 /Fc(30μg/ml)组,p75NTR-/-基因型神经元设对照组和proBDNF(30ng/ml)组.采用MTT法检测各组处理24h后新生海马神经元的存活情况,免疫荧光染色观察各组处理72h后的突起长度.结果 经MAP2和DAPI双重荧光染色鉴定,成功培养出高纯度新生海马神经元.MTT检测结果显示,在p75NTR+/+型海马神经元中,proBDNF组570nm处吸光度值(A570)明显小于对照组(p<0.05),加入p75NTR受体竞争性抑制剂p75/Fc后与对照组相比差异无统计学意义(p>0.05);在p75NTR-/-型海马神经元中,proBDNF组A570值与对照组差异无统计学意义(P>0.05).免疫荧光染色显示,p75NTR+/+神经元proBDNF组神经突起长度明显小于对照组(P<0.05),proBDNF(30ng/ml) +p75/Fc(30μg/ml)组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05); p75NTR-/-神经元proBDNF组神经突起长度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 proBDNF通过p75NTR受体途径抑制神
作者:陈甲;矫树生;梁春荣;王延江;许志强
来源:解放军医学杂志 2014 年 39卷 9期