目的 探讨悬浮培养法富集结直肠癌肿瘤干细胞(CSCs)的过程是否与诱导上皮间质转化(EMT)有关.方法 以采用悬浮培养法培养出的结直肠癌SW620细胞3D微球体及其亲本细胞SW620为研究对象.采用流式细胞技术、Western blotting检测CSCs标记物CD44、Ep-CAM的表达,并行软琼脂克隆实验、NOD/SCID小鼠成瘤实验,以验证3D微球体是否富集CSCs;采用Western blotting检测EMT标记物E-钙黏蛋白(E-Ca)、N-钙黏蛋白(N-Ca)及波形蛋白(Vim)在3D微球体细胞及亲本SW620细胞中的表达差异.结果 与亲本SW620细胞比较,3D微球体细胞软琼脂克隆形成能力明显增强(P<0.01),NOD/SCID小鼠成瘤能力明显提高,CD44+细胞百分比增加,Ep-CAM蛋白表达量明显增高(P<0.01),上皮细胞标记物E-Ca表达明显降低(P<0.01),而间质细胞标记物N-Ca和Vim表达明显增高(P<0.01).结论 悬浮培养法富集结直肠癌CSCs可能与诱导EMT有关.
作者:程家平;黎江;苏弦;陈奕霖;曾庆良;文坤明
来源:解放军医学杂志 2016 年 41卷 9期