目的 研究高糖高脂对小鼠心脏微血管内皮细胞(MCMECs)的影响以及线粒体外膜转运蛋白70(Tom70)的作用,并探讨相关机制.方法 将MCMECs分为正常糖组(NG组,给予5.5mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组,给予25mmol/L葡萄糖)和高糖高脂组(HG+HF组,给予25mmol/L葡萄糖以及500μmol/L混合脂肪酸).采用Tom70 siRNA敲低MCMECs中Tom70的表达,进一步将HG+HF组分为对照组(Control组仅转染试剂)、阴性对照siRNA组(Negative siRNA组,转染非特异性阴性Scramble siRNA)和Tom70-siRNA组.为探索Tom70在高糖高脂诱导的MCMECs损伤中的可能作用机制,将Tom70-siRNA组分为不含N-乙酰半胱氨酸(NAC)组和含NAC组.通过流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,ELISA试剂盒测定MCMECs中一氧化氮(NO)的生成,RT-qPCR和免疫荧光检测MCMECs中Tom70的表达变化,DHE染色法与ELISA法测定细胞内活性氧簇(ROS)的水平.结果 高糖可增加MCMECs的凋亡、减少NO生成,而合并高脂可加重这些损伤(P＜0.05).高糖可抑制MCMECs中Tom70的表达,促进ROS生成(P＜0.05);与HG组相比,高糖合并高脂可进一步抑制Tom70的表达,同时显著增加了ROS的生成(P＜0.05).更重要的是,与Control组和Negative siRNA组相比,Tom70-siRNA组胞内ROS含量和细胞凋亡率增加,NO生成显著减少(P＜0.01).与此相

作者：侯娟妮；杜劲；李秀川；陈莎；冯健；冯娟；田玥；杨怡；裴海峰；杨大春

来源：解放军医学杂志 2018 年 43卷 4期