目的 探讨双mTORC1/2抑制剂AZD2014诱导的自噬对人肝癌细胞株HCCLM3增殖的影响.方法 体外培养人肝癌细胞株HCCLM3,培养过程中分别加入AZD2014、雷帕鸣或3-甲基腺嘌呤(3-MA),使终浓度分别为100 nmol/L、100 nmol/L和10 mmol/L.研究AZD2014对HCCLM3肝癌细胞自噬的影响时,按处理因素分为对照组、雷帕鸣组、AZD2014组、3-MA组、雷帕鸣+3-MA组和AZD2014+3-MA组,采用MDC染色法检测HCCLM3肝癌细胞中自噬囊泡的变化;研究AZD2014对HCCLM3肝癌细胞中自噬相关蛋白表达的影响时,按处理因素分为对照组、雷帕鸣组和AZD2014组,采用Western blotting检测HCCLM3肝癌细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ和Beclin-1的表达;研究AZD2014诱导的自噬对HCCLM3肝癌细胞增殖的影响时,按处理因素分为对照组、3-MA组、AZD2014组和AZD2014+3-MA组,采用CCK-8法检测HCCLM3肝癌细胞的增殖情况.结果 MDC染色显示,与对照组比较,AZD2014处理后,HCCLM3肝癌细胞中自噬囊泡的数量较多、体积较大.Western blotting检测结果显示,AZD2014处理后,HCCLM3肝癌细胞中LC3B-Ⅱ和Beclin-1表达水平均明显高于对照组(P<0.05).CCK-8法检测结果显示,自噬抑制剂(3-MA)可部分逆转AZD2014对HCCLM3肝癌细胞增殖的抑制作用.结论 双mTORC1/2抑制剂AZD2014可通过诱导自噬抑制HC

作者：廖晖；徐小平；周陈杰；张健民；钟克波；杨定华

来源：解放军医学杂志 2020 年 45卷 5期