目的 探讨脯氨酸/丝氨酸丰富的卷曲螺旋蛋白1(PSRC1)与膜联蛋白A2(ANXA2)相互作用减缓动脉粥样硬化进展的可能机制.方法 为检测与PSRC1结合的蛋白,将RAW264.7巨噬细胞分为Ad-GFP+ox-LDL组与Ad-PSRC1+ox-LDL组,采用非标记定量蛋白质组学方法检测与PSRC1结合的蛋白表达水平;采用免疫共沉淀(Co-IP)实验及免疫荧光实验对上述蛋白质谱结果进行验证.为检测ox-LDL刺激下过表达PSRC1对ANXA2分泌的影响,将RAW264.7巨噬细胞分为四组(对照组、ox-LDL组、Ad-GFP+ox-LDL组、Ad-PSRC1+ox-LDL组),采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组培养上清中ANXA2的水平.为检测Ad-shANXA2对AXNA2的敲低效果,将RAW264.7巨噬细胞分为Ad-GFP组与Ad-shANXA2组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞内ANXA2 mRNA的表达情况.为检测敲低ANXA2对主动脉斑块进展及炎性因子分泌的影响,将24只ApoE-/-小鼠随机分为四组(n=6):普通饮食+Ad-GFP组、普通饮食+Ad-shANXA2组、高脂饮食+Ad-GFP组、高脂饮食+Ad-shANXA2组,采用油红O染色观察主动脉大体及主动脉根部动脉粥样硬化(AS)面积,并采用ELISA检测高脂饮食+Ad-GFP组与高脂饮食+Ad-shANXA2组小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6的水平.结果 蛋白质组学检测结果显示,用ox-LDL刺激后PSRC1与ANXA2
作者:郭中州;张亚南;刘季晨;郭志刚
来源:解放军医学杂志 2021 年 46卷 5期