目的 探讨WT1基因在骨肉瘤中的表达及其对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法体外培养人成骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞MG－63细胞, Western blot法观察WT1蛋白的表达情况.体外培养MG－63细胞,分为siRNA－1组、siRNA－2组、阴性对照组(NC)组、空白对照组,分别转染WT1 siRNA－1、WTI siRNA－2及NC链,空白对照只加入转染试剂.转染后采用实时荧光定量PCR( qPCR)检测siRNA－1组、siRNA－2组、NC组、空白对照组MG－63细胞WT1基因mRNA的表达情况,选择抑制效果好的siRNA－2组用于后续实验.将转染后的MG－63细胞分为siRNA－2组、NC组,CCK－8法检测细胞增殖情况,流式细胞技术检测细胞凋亡率,比色法检测Caspase－3活性,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,Western blot法检测WT1、Bcl－2、MMP－2蛋白的表达水平.结果 Western blot 法检测结果显示,骨肉瘤MG－63细胞中WT1蛋白的相对表达量1.29 ±0.14,明显高于成骨细胞hFOB1.19 的0.23 ±0.07,差异有统计学意义(t＝6.603, P＜0.01). qPCR检测结果显示,骨肉瘤MG－63细胞转染后,siRNA－1组、siRNA－2组WT1 mRNA相对表达量均低于NC组和空白对照组,其中siRNA－2的抑制效果更显著,差异有统计学意义( F＝12.470, P＜0.05).根据此结果选择siRNA－2进行后续实验.转染siRNA－2后,CC

作者：张翼；李甲振；张岩；卢新昌；张彬

来源：中华解剖与临床杂志 2019 年 24卷 4期