HPV16、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体的构建-临床诊疗知识库

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作者：

陈富强；邓金桂；兰新平；孙业红；李体远

来源：

暨南大学学报(自然科学与医学版) 2009 年 30卷 6期

标签：

人乳头瘤病毒16、18型基因克隆定点突变 E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体 human papillomavirus type 16,18 gene cloning site-directed mutagenesis E6/E7fusion gene vaccinia virus expression vector

目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体.方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A.HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,并将二者连接成载体pSC-A-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E(pSC-T,HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7:T),最后以痘苗病毒表达载体pJ38为转移载体,构建质粒pJ38-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pJ38-T),对所有重组质粒进行酶切鉴定和测序分析.结果:E6/E7融合基因成功克隆到pJ38上.结论:成功构建表达HPV E6/E7融合基因重组痘苗病毒载体,为研制宫颈癌治疗性疫苗奠定基础.

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