通过检测草鱼禁食后神经肽Y(NPY)与血糖的变化,探讨NPY对草鱼食欲的调控机理,并在体外进行草鱼NPY蛋白的重组表达及纯化,为后期草鱼NPY蛋白的功能研究奠定基础.采用草鱼禁食后取血测定血糖值,利用荧光定量PCR的方法检测草鱼脑中NPY基因的mRNA水平;以pET-32a(+)为载体构建重组质粒,转人大肠杆菌感受态细胞,通过1.0 mmol/L IPTG诱导表达、His-Tag亲和层析柱纯化获得重组蛋白.结果显示草鱼NPY基因的表达量和血糖水平呈负相关;IPTG诱导得到质量浓度为1.43 mg/mL的重组草鱼NPY融合蛋白.草鱼禁食后血糖值下降,NPY表达量增加,说明NPY可能参与草鱼摄食调控.
作者:方龙;梁旭方;何珊
来源:暨南大学学报(自然科学与医学版) 2013 年 34卷 5期