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目的 制备和纯化抗人大肠癌单克隆抗体(ND-1),分析其在大肠癌诊断中的应用价值.方法 常规免疫小鼠制备腹水,腹水经离心和过滤后,应用G蛋白亲和层析法进行纯化.采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性.并用免疫组织化学SP法检测在大肠癌组织中的表达.结果 经SDS-PAGE分离可见两条相对分子质量(Mr)分别为55 000和25 000明显的两条蛋白条带.间接ELISA检测抗体效价为1∶1 000 000,ND-1抗体对表达相应抗原的大肠癌细胞株具有特异结合活性.人大肠癌组织切片经ND-1抗体免疫组织化学染色阳性率为82.9

作者:冯慧;宋今丹

来源:解剖科学进展 2006 年 12卷 3期

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作者:
冯慧;宋今丹
来源:
解剖科学进展 2006 年 12卷 3期
标签:
人大肠癌 单克隆抗体 纯化 大肠癌
目的 制备和纯化抗人大肠癌单克隆抗体(ND-1),分析其在大肠癌诊断中的应用价值.方法 常规免疫小鼠制备腹水,腹水经离心和过滤后,应用G蛋白亲和层析法进行纯化.采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性.并用免疫组织化学SP法检测在大肠癌组织中的表达.结果 经SDS-PAGE分离可见两条相对分子质量(Mr)分别为55 000和25 000明显的两条蛋白条带.间接ELISA检测抗体效价为1∶1 000 000,ND-1抗体对表达相应抗原的大肠癌细胞株具有特异结合活性.人大肠癌组织切片经ND-1抗体免疫组织化学染色阳性率为82.9