目的 探讨激素刺激时间、体外培养时间对小鼠卵母细胞核成熟及不同激活方案对卵母细胞孤雌激活、胚胎发育能力的影响.方法 孕马血清促性腺激素(PMSG)超排处理,在体外培养的不同时间点检测卵母细胞核成熟率(每个处理至少重复3次,3只/重复,以下实验相同).分别采用乙醇结合6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)法和SrCl2法激活卵母细胞,胚胎培养液选用CZB[胎牛血清(FBS)或牛血清清蛋白(BSA)]两种,确定最佳激活方案.对不同时间点成熟的卵母细胞进行激活,确定最佳激活卵龄.研究缩短PMSG刺激时间对卵母细胞发育的影响.结果 将PMSG刺激时间从46h缩短至24h,卵母细胞获得最高核成熟率(97.6％ vs 91.9％)的培养时间由14h延长至16h;缩短PMSG刺激时间,核成熟率不受影响,但能显著降低激活率(91.2％ vs37.1％)和囊胚率(20.9％ vs0.0％).两种方法体内成熟卵母细胞激活率均高于90％,但囊胚率差异显著(P＜0.05).卵母细胞体外培养至24～26h时,激活率(89.5％)和囊胚率(21.9％)均达到最高点.结论 建立了一种小鼠卵母细胞体外成熟培养系统,即PMSG超排处理46h、卵母细胞培养24h,CZB(10mmol/L SrCl2)激活2.5h后采用CZB (0.5％ BSA)进行胚胎培养.
作者：葛丽；杜辉；刘立伟；苏衍萍
来源：解剖学报 2013 年 44卷 4期
