目的 克隆日本三角涡虫热休克蛋白90(Djhsp90)基因,并对其在不同应激条件下表达模式进行分析.方法 采用PCR技术克隆日本三角涡虫hsp90 cDNA全长序列和基因组DNA序列,利用生物信息学软件对其序列进行分析,采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测其在再生、饥饿和热激过程中的表达模式.结果 Djhsp90 cDNA全长2354 bp,含有2148 bp的开放阅读框(ORF),编码715个氨基酸,含有真核生物HSP90家族蛋白的5个标签序列和末端高度保守序列MEEVD.基因组DNA测序表明,该基因仅含有1个内含子(48 bp),内含子的5'-和3'-剪切位点符合经典的“GT-AG”法则.涡虫切断后1d Djhsp90的表达量显著增加,2d达到高峰,3d后逐步下降到正常水平.持久饥饿过程中Djhsp90的表达量维持在较高水平.提高培养温度能显著诱导Djhsp90的表达,且涡虫头部对热效应最敏感.结论 我们成功克隆了日本三角涡虫hsp90基因,并证实切割、饥饿和热激能诱导其表达上调.
作者：马克学；冯程程；豆贺；程方方；陈广文；刘德增
来源：解剖学报 2013 年 44卷 6期
