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目的:探讨硫化氢( H2 S)对氧糖剥夺/复氧( OGD/R)诱导神经元损伤的影响。方法小鼠皮层神经元用无糖厄尔氏平衡盐溶液(EBSS)于2% O2、5% CO2、93% N237℃培养4h,换用neurobasal +B27培养基于37℃5%CO2培养箱中继续培养12h,建立OGD/R模型。以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率;用fura-2/AM和显微荧光成像系统检测神经元胞质钙离子浓度([Ca2+]i);利用比色法检测乳酸脱氢酶( LDH)释放率;碘化丙啶( PI)染色检测细胞损伤。结果200、300与600μmol/L NaHS预处理30min再OGD/R,神经元存活率显著提高(n=4);300μmol/L NaHS预处理后再OGD/R,[Ca2+]i(n=5)、LDH释放率( n=4)和细胞损伤率( n=6)均低于OGD/R组,且使用10μmol/L钙螯合剂BAPTA也降低OGD/R诱导的LDH释放率和细胞损伤率。结论 H2 S减轻OGD/R所致皮层神经元损伤,其机制与H2 S抑制OGD/R诱导神经元钙超载有关。

作者:伍吉云;魏慈照;徐悦青;刘路宽;张洋萍;魏楚蓉;毛慕华;罗友根

来源:解剖学报 2014 年 3期

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作者:
伍吉云;魏慈照;徐悦青;刘路宽;张洋萍;魏楚蓉;毛慕华;罗友根
来源:
解剖学报 2014 年 3期
标签:
氧糖剥夺/复氧 硫化氢 细胞损伤 钙超载 显微荧光成像 小鼠 Oxygen-glucose deprivation/reoxygenation Hydrogen sulfide Cell injury Calcium overload Fluorescence microscopic imaging Mouse
目的:探讨硫化氢( H2 S)对氧糖剥夺/复氧( OGD/R)诱导神经元损伤的影响。方法小鼠皮层神经元用无糖厄尔氏平衡盐溶液(EBSS)于2% O2、5% CO2、93% N237℃培养4h,换用neurobasal +B27培养基于37℃5%CO2培养箱中继续培养12h,建立OGD/R模型。以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率;用fura-2/AM和显微荧光成像系统检测神经元胞质钙离子浓度([Ca2+]i);利用比色法检测乳酸脱氢酶( LDH)释放率;碘化丙啶( PI)染色检测细胞损伤。结果200、300与600μmol/L NaHS预处理30min再OGD/R,神经元存活率显著提高(n=4);300μmol/L NaHS预处理后再OGD/R,[Ca2+]i(n=5)、LDH释放率( n=4)和细胞损伤率( n=6)均低于OGD/R组,且使用10μmol/L钙螯合剂BAPTA也降低OGD/R诱导的LDH释放率和细胞损伤率。结论 H2 S减轻OGD/R所致皮层神经元损伤,其机制与H2 S抑制OGD/R诱导神经元钙超载有关。