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目的 探讨神经生长因子(NGF)与食管鳞癌细胞分化的相关性.方法 采用有限稀释法分选出圆形和梭形单细胞克隆,采用无血清悬浮培养获得细胞球细胞,贴壁的Eca109细胞分别在含血清和不含血清培养基中培养48h;分别采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫印迹法,检测NGF在食管鳞癌细胞中mRNA水平和蛋白水平的表达;免疫荧光技术检测NGF在食管鳞癌细胞中的表达定位;免疫组织化学法检测食管鳞癌组织中NGF的表达定位;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NGF在Eca109细胞培养基中的分泌情况.结果 在Eca109细胞中能检测到NGF的mRNA水平和蛋白水平的表达,其中NGF在细胞球细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达量最高.食管癌组织中检测到NGF表达于细胞质.Eca109细胞在无血清培养条件下能够分泌NGF,且明显高于含血清培养基中的含量.结论 食管癌细胞系Eca109表达并分泌NGF,并且食管癌组织中表达NGF,NGF可能在维持食管鳞状细胞癌的干细胞特性发挥了重要作用.

作者:李秋霞;裴学莲;刘洋;王玉婷;黄燕燕;周宗瑶;慕晓玲

来源:解剖学报 2015 年 46卷 3期

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作者:
李秋霞;裴学莲;刘洋;王玉婷;黄燕燕;周宗瑶;慕晓玲
来源:
解剖学报 2015 年 46卷 3期
标签:
食管鳞状细胞癌 神经生长因子 Eca109细胞 免疫组织化学 反转录-聚合酶链反应 免疫印迹法 酶联免疫吸附法 Esophageal squamous cell carcinoma Nerve growth factor Eca109 cell Immunohistochemistry RT-PCR Western blotting ELISA
目的 探讨神经生长因子(NGF)与食管鳞癌细胞分化的相关性.方法 采用有限稀释法分选出圆形和梭形单细胞克隆,采用无血清悬浮培养获得细胞球细胞,贴壁的Eca109细胞分别在含血清和不含血清培养基中培养48h;分别采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫印迹法,检测NGF在食管鳞癌细胞中mRNA水平和蛋白水平的表达;免疫荧光技术检测NGF在食管鳞癌细胞中的表达定位;免疫组织化学法检测食管鳞癌组织中NGF的表达定位;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NGF在Eca109细胞培养基中的分泌情况.结果 在Eca109细胞中能检测到NGF的mRNA水平和蛋白水平的表达,其中NGF在细胞球细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达量最高.食管癌组织中检测到NGF表达于细胞质.Eca109细胞在无血清培养条件下能够分泌NGF,且明显高于含血清培养基中的含量.结论 食管癌细胞系Eca109表达并分泌NGF,并且食管癌组织中表达NGF,NGF可能在维持食管鳞状细胞癌的干细胞特性发挥了重要作用.