目的 探讨微小RNA(miR)-486对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的体外帕金森病(PD)PC12细胞模型凋亡的影响和机制.方法 实验分成对照(control)组、PD组(MPP+诱导PC12细胞)、miR-NC组[MPP+诱导 PC12 细胞转染模拟(mimics)对照(mimics control)]、miR-486 组(MPP+诱导 PC12 细胞转染 miR-486 mimics)、miR-486+载体(vector)组(共转染 miR-486 mimics 和 pcDNA3.1)、miR-486+TRIM10 组(共转染 miR-486 mimics 和pcDNA3.1-TRIM10),每组n=9.CCK-8法分析细胞增殖变化,流式细胞术分析细胞凋亡水平变化,Western blotting分析Bax和Bcl-2蛋白表达变化,硫代巴比妥酸法检测细胞中丙二醛(MDA)含量,荧光探针法检测细胞中活性氧簇(ROS)水平,二硝基苯肼分析培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)水平.用生物信息学软件预测miR-486的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-486、TRIM10靶向关系.结果 与control组比较,PD组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平升高.与miR-NC组比,miR-486组细胞存活率、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA、ROS和LDH水平降低.MiR-486靶向下调TRIM 10表达.与miR-486+vector组比较,miR-486+TRIM10组细胞存活率、Bcl-2蛋白水平降低,细胞凋亡率、Bax蛋
作者:廖建云;江新柳;谢为法
来源:解剖学报 2022 年 53卷 4期