目的 探讨构建hSAMP32 DNA疫苗的方法.方法 根据Genbank hSAMP32 cDNA序列设计引物,RT-PCR得到hSAMP32 DNA,将其亚克隆至pGEM-T载体,酶切鉴定后测序;再构建pcDNA3.1(+)-hSAMP32质粒,并对质粒DNA定量.结果 (1)人睾丸组织中提取的总RNA显示2条清晰条带,分别对应28S、18S;RT-PCR扩增产物与预期的目的基因hSAMP32长度一致;(2)RT-PCR产物与载体pGEM-T连接后测序,显示其与Genbank的hSAMP32基因序列一致;(3)超螺旋的pcDNA3.1(+)-hSAMP32 DNA疫苗不含内毒素.结论 应用亚克隆技术构建hSAMP32 DNA避孕疫苗的载体pcDNA3.1(+)-hSAMP32,为研制避孕疫苗奠定实验基础.
作者:臧卫东;陈雪梅;任秀花;石冰涛;赵青赞;曹静;郝莉
来源:解剖学研究 2006 年 28卷 3期