目的:体外培养并鉴定人胚胎干细胞(EG细胞),在不添加细胞因子的条件下,观察细胞集落分化情况.方法:取4～6周人胚胎生殖嵴、肠背系膜和中肾嵴,进行组织块培养,利用组织化学和免疫组织化学技术对培养的细胞进行鉴定.结果:培养7～8小时,在组织块周围出现成纤维细胞;5～7天后,在成纤维细胞上出现EG细胞集落,集落内细胞表达阶段特异性胚胎表面抗原SSEA-1和SSEA-3,并表达碱性磷酸酶(ALP)活性;培养18天后,有6个集落分化为有节律跳动的心肌细胞,这些细胞集落在继续培养15天后,仍能有节律收缩.此时集落内细胞ALP表达呈阴性,但仍有少量细胞表达SSEA-1和SSEA-3.结论:体外培养人胚生殖嵴、肠背系膜和中肾嵴组织块,以内源性的成纤维细胞作为饲养层,可以分离得到EG细胞集落,一些EG细胞集落可以自发地分化成心肌细胞.
作者：陈曦；刘斌
来源：解剖学杂志 2002 年 25卷 4期
