目的:筛选高温致金黄地鼠神经管畸形的上调表达基因,探讨其分子生物学机制.方法:通过抑制性消减杂交技术获得消减产物,转化大肠杆菌DH5α,构建高温致金黄地鼠胚胎神经管畸形的消减cDNA文库;联合蓝白斑和菌落PCR方法筛选含插入片段的阳性克隆,进行测序和同源性分析,并经Northern杂交技术检测基因的表达.结果:成功构建高温致金黄地鼠胚胎神经管畸形的消减cDNA文库,其中2个克隆插入片段的基因序列与小鼠磷酸甘油酸酯激酶(Pgk-1)同源.Northern杂交证实该基因在高温致畸胚胎神经管的表达较其在同龄正常胚胎神经管明显升高.结论:Pgk-1的上调表达可能与高温致神经管畸形密切相关.
作者:杨青;高英茂;李少玲
来源:解剖学杂志 2007 年 30卷 2期