目的:采用不同培养基和饲养层培养人胚胎干细胞H1,建立适合H1细胞增殖的最佳条件并分析其基本生物学特性.方法:鼠源性饲养层采用ICR品系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF),人源性饲养层采用人胚胎成纤维细胞系(HFF-1).H1基本培养基配制分别采用传统DMEM/F12和改良培养基Knock-outTM DMEM.实验共分为MEF+DMEM/F12、MEF+K-DMEM、HFF+DMEM/F12、HFF+K-DMEM组.H1基本生物学特性检测采用免疫荧光、RT-PCR、碱性磷酸酶和核型分析.结果:MEF+DMEM/F12组中H1克隆形态规则,不发生分化,增殖速度快;而MEF+K-DMEM组细胞克隆传代后第4日发生分化;HFF+DMEM/F12组和HFF+K-DMEM组细胞传代后第3日就显示出分化趋势,克隆变扁.MEF+DMEM/F12组中H1细胞保持正常核型和基本生物学特性.结论:不同的人胚胎干细胞系最佳培养条件是不同的,建立的MEF+DMEM/F12组培养条件最适合H1细胞增殖.
作者：郭新；秦洁；张键荣；唐爱发；余振东；石敏；桂耀庭；蔡志明
来源：解剖学杂志 2008 年 31卷 3期
