目的:探索有效的固定及渗透方法,以提高鸡胚骨骼肌卫星细胞免疫荧光显色的效果.方法:培养18胚龄鸡胚胸大肌卫星细胞,免疫荧光显色前采用4种不同的固定和渗透方法处理.95%乙醇固定15 min;95%乙醇固定,15 min,再用0.25%Triton X-100穿透10 min;先用4%多聚甲醛固定40 min,再用0.25%Triton X-100穿透10 min;预冷的丙酮固定10min.结果:乙醇+Triton X-100处理的卫星细胞形态完整,细胞骨架蛋白结蛋白(Desmin)、生长分化因子-8(GDF-8)2种胞质蛋白的免疫荧光显色效果最好.结论:染色前采用95%乙醇固定15 min结合0.25%Triton X-100穿透10 min对鸡胚骨骼肌卫星细胞的免疫荧光显色效果更好.
作者:杨秀娟;王子旭;曹静;陈耀星
来源:解剖学杂志 2012 年 35卷 5期