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目的:建立细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)体外扩增的方法,并从单细胞水平分析CIK细胞的胞内Th1/Th2类因子产生的情况,进一步明确CIK细胞的免疫学特性及其参与的免疫效应机制.方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMC),按一定的时间顺序分别加入IFN-γ、IL-2和CD3单抗,体外扩增CIK细胞,再应用流式细胞术,经刺激、阻断、固定、穿透和标记等过程测定CIK细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4水平.结果:外周血单个核细胞加细胞因子培养两周后CD3+CD56+增加,培养至第21天、28天未见明显下降;诱导后CD3+CD8+细胞量与CD3+CD4+量相比明显增多;单细胞胞内细胞因子测定显示扩增后的CIK细胞Th1/Th2因子状态明显向Th1偏移.结论:采用多种因子组合刺激外周血单个核细胞,可大量诱导出CD3+CD56+双阳性细胞,具高度增殖性,是一类新型的免疫过继疗法细胞;其偏移的Th1/Th2因子状态可作为解释其极强的细胞毒作用的理论依据.

作者:王文红;缪竞诚

来源:江苏大学学报(医学版) 2005 年 15卷 1期

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作者:
王文红;缪竞诚
来源:
江苏大学学报(医学版) 2005 年 15卷 1期
标签:
细胞因子诱导的杀伤细胞 Th1/Th2 流式细胞术
目的:建立细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)体外扩增的方法,并从单细胞水平分析CIK细胞的胞内Th1/Th2类因子产生的情况,进一步明确CIK细胞的免疫学特性及其参与的免疫效应机制.方法:取健康人外周血单个核细胞(PBMC),按一定的时间顺序分别加入IFN-γ、IL-2和CD3单抗,体外扩增CIK细胞,再应用流式细胞术,经刺激、阻断、固定、穿透和标记等过程测定CIK细胞内细胞因子IFN-γ和IL-4水平.结果:外周血单个核细胞加细胞因子培养两周后CD3+CD56+增加,培养至第21天、28天未见明显下降;诱导后CD3+CD8+细胞量与CD3+CD4+量相比明显增多;单细胞胞内细胞因子测定显示扩增后的CIK细胞Th1/Th2因子状态明显向Th1偏移.结论:采用多种因子组合刺激外周血单个核细胞,可大量诱导出CD3+CD56+双阳性细胞,具高度增殖性,是一类新型的免疫过继疗法细胞;其偏移的Th1/Th2因子状态可作为解释其极强的细胞毒作用的理论依据.