目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-peDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgGIFc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IsGlFc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-lgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒.将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达.结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础.
作者：崔大伟；王胜军；陈君；仝佳；陈建国；王海生；杨先知；史烨；许化溪；邵启祥
来源：江苏大学学报（医学版） 2009 年 19卷 1期
