目的:原核表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白(rhoptry proteins,ROPs) 18,建立检测和定位虫体ROP18蛋白的方法.方法:运用PCR技术扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因,克隆至pET-28a(+)载体,转化至大肠埃希菌Rosetta中诱导表达,经KC1染色切胶纯化重组ROP18蛋白,并制备其兔多克隆抗体.采用蛋白质印迹技术和间接免疫荧光技术(indirect immunofluorescence assay,IFA)检测和定位ROP18在弓形虫速殖子体内的表达.结果:成功表达重组ROP18蛋白,并获得其多克隆抗体.经蛋白质印迹技术检测出虫体ROP18特异性条带,IFA技术检测出ROP18分布于虫体棒状体.结论:通过制备多克隆抗体,利用蛋白质印迹技术和IFA技术能检测和定位ROP18蛋白在弓形虫体内表达.
作者：鞠爱萍；吴亮；沈进；李礼；姜旭淦；陈盛霞
来源：江苏大学学报（医学版） 2013 年 23卷 3期
