目的:探讨利福平对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)多聚体水平的影响及其与细胞自噬的关系.方法:用不同浓度鱼藤酮、利福平、自噬抑制剂氯喹和自噬促进剂雷帕霉素处理SH-SY5Y细胞,MTT法检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度;蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素处理后不同时间点细胞内Beclin-1表达水平,确定最佳作用时间;蛋白质印迹法检测鱼藤酮、氯喹和雷帕霉素处理后Beclin-1和α-syn多聚体的表达;将SH-SY5Y细胞分为对照组、鱼藤酮组、利福平+鱼藤酮组和利福平组,流式细胞术检测4组细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测α-syn多聚体及自噬标志蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;在上述分组基础上,蛋白质印迹法检测氯喹和雷帕霉素预处理后各组细胞α-syn多聚体的表达.结果:利福平浓度为150μmol/L时细胞存活率最高;氯喹、雷帕霉素调节自噬的最佳处理条件分别为10μmol/L(1 h)、10 nmol/L(2 h);与对照组相比,鱼藤酮、氯喹均能显著增加细胞内α-syn多聚体表达(P均<0.01),降低Beclin-1表达(P均<0.05),雷帕霉素能显著提高Beclin-1表达(P<0.01);与对照组比较,鱼藤酮组细胞凋亡率明显上升(P<0.05),p62和α-syn多聚体表达增加,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ表达明显降低(P均<0.01);与鱼藤酮组相比,利福平+鱼藤酮组细胞凋亡率明显降
作者：王春燕；冯凡；巩企霞；束瑜；万晟霞；赵晶；徐平；钱进军
来源：江苏大学学报（医学版） 2018 年 28卷 6期
