目的:探讨线粒体活性氧在心肌成纤维细胞NLRP3炎症小体激活中的作用.方法:培养原代小鼠心肌成纤维细胞,细胞分为对照组(正常培养组),使用脂多糖刺激的引发组,使用脂多糖加三磷酸腺苷的激活组,以及再加用mito-TEMPO的干预组.通过MitoSOX染色检测各组细胞线粒体活性氧水平;通过蛋白质印迹法检测细胞内NLRP3、凋亡相关微粒样蛋白(ASC)、Pro-caspase-1、Pro-IL-1β及上清液中caspase-1 p20、IL-1β蛋白水平;用酶联免疫吸附法检测上清液中IL-1β蛋白的含量;使用免疫共沉淀法观察ASC与NLRP3蛋白的结合情况.结果:激活组细胞胞内线粒体活性氧水平较对照组明显增加(P<0.05),而干预组线粒体活性氧水平较激活组明显下降(P<0.05);心肌成纤维细胞经脂多糖刺激后,细胞内NLRP3和Pro-IL-1β蛋白较对照组明显升高(P<0.05),干预组中Pro-IL-1β较激活组明显升高(P<0.05).激活组上清液中caspase-1 p20和IL-1β较对照组明显升高(P<0.05),干预组caspase-1 p20和IL-1β较激活组明显减少(P<0.05).激活组NLRP3-ASC连接形成复合体,干预组NLRP3和ASC的结合减少.结论:心肌成纤维细胞中线粒体活性氧通过促进NLRP3蛋白和ASC蛋白的结合,使NLRP3炎症小体激活.
作者：颜骏；张浩；王好；陶艾彬；姚永伟；张国辉；芮涛
来源：江苏大学学报（医学版） 2020 年 30卷 3期
