目的:构建痢疾弗氏志贺菌2a T32的asd基因全缺失突变体.方法:采用全菌PCR技术,从痢疾弗氏2a T32株染色体扩增了asd基因及其上下游各约500 bp的染色体DNA序列,并将其克隆至pUC18,测定其核苷酸序列,在体外用ctxB基因置换了asd基因,然后将其克隆至自杀载体pXL275.通过细菌交配和体内同源重组,用ctxB基因完全取代痢疾弗氏2a T32株染色体上的asd基因.结果与结论:构建成asd基因全缺失而稳定表达CtxB的T32突变株FWL01,为进一步用载体/宿主平衡致死系统构建多价菌苗候选株打下了基础.
作者：王恒樑；冯尔玲；林云；廖翔；苏国富
来源：军事医学科学院院刊 2000 年 24卷 2期
