目的: 检测Cre重组酶在心肌细胞特异性Cre重组酶转基因小鼠(α-MHC-Cre)中的组织分布及其在体内介导基因重组的作用. 方法:将α-MHC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测.然后,将α-MHC-Cre小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠交配,利用PCR和Southern杂交对Cre重组酶介导重组的组织特异性进行检测.结果:LacZ染色表明,Cre重组酶只在心肌细胞中特异性表达并介导ROSA位点LoxP序列间的重组.PCR和Southern结果显示Cre重组酶只在心肌细胞中特异地剔除了Smad4基因,进一步验证了Cre重组酶在心肌细胞中发挥介导LoxP位点重组的作用. 结论:α-MHC-Cre转基因小鼠具有良好的组织特异性,只在心肌细胞中表达Cre重组酶,并能在体内成功地介导心肌细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制心肌细胞特异性基因剔除小鼠的工具小鼠.
作者：王剑；张继帅；侯宁；滕艳；程萱；杨晓
来源：军事医学科学院院刊 2005 年 29卷 5期
