目的：建立能同时检测人细小病毒B19（简称B19病毒）3种基因型的通用核酸检测（ NAT）体系，并进行方法学评价。方法对B19病毒3种基因型代表毒株全序列进行比对，选取其保守区域（ NS1区）设计B19病毒的通用引物和探针。为避免假阴性结果，在体系中引入竞争性噬菌体内标。将适宜浓度的内标添加到一系列梯度稀释的参考品质粒中，建立B19病毒实时荧光定量PCR（ qPCR）标准曲线。对建立的B19病毒通用NAT体系分别进行敏感性、特异性、重复性等方法学评价。结果建立的B19病毒实时qPCR检测体系的标准曲线在1×109～1× 103拷贝（copies）／μl模板浓度范围内相关性良好。方法学评价显示，体系的最低检测下限为10拷贝／μl；与其他血源传播病毒等无交叉反应；批内和批间实验重复性良好。结论建立了B19病毒3种基因型全检的通用NAT体系，不仅可用于B19病毒感染的诊断，还可用于血液和血液制品中B19病毒的NAT筛查，对于保障输血和血液制品的病毒安全性具有重要意义。
作者：贾俊婷；郭逸；赵雄；马玉媛；章金刚
来源：军事医学 2015 年 3期
