目的 体外诱导人诱导性多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSC)向造血分化,富集生血内皮细胞,将其与高表达NOTCH信号通路配体DLL4的内皮细胞共培养,体外建立内皮微环境促进多能干细胞造血分化的研究模型,进一步研究明确内皮微环境影响造血干/祖细胞产生的作用及机制.方法 将携带runx1c报告基因的hiPSC通过spinEB方法诱导分化形成拟胚体(embryonic body,EB),在诱导分化第10天通过免疫磁珠分选技术(magnetic-activated cell sorting,MACS)分选富集出CD34 +的生血内皮细胞,将生血内皮细胞与高表达DLL4的内皮微环境细胞VeraVec共培养,进一步诱导其向造血干/祖细胞分化,最终建立体外研究NOTCH信号通路促进多能干细胞向造血干/祖细胞分化的研究模型.结果 建立了单细胞培养hiPSC的技术方法,将单细胞培养的携带runx1c报告基因的hiPSC通过spinEB方法诱导其向造血细胞分化,在诱导分化第10天利用MACS技术分离富集了CD34 +的生血内皮细胞.同时获得了转染E4ORF1的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,UVEC)VeraVec细胞,并对其NOTCH信号通路相关基因的表达进行了鉴定.结果表明,其在mRNA水平和蛋白水平均高表达NOTCH信号通路的配体DLL4.将分离富集的生血内皮细胞与高表达DLL4的内

作者：赵月；王文秀；张博文；何丽娟；曾泉；范增；岳文；裴雪涛；习佳飞

来源：军事医学 2017 年 41卷 9期