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目的 探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制.方法 通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转染进肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721,筛选得到稳定过表达KPC1的肝癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬转敲低肝癌细胞系中的KPC1;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝癌细胞系中KPC1蛋白的表达水平,验证过表达和敲低KPC1的效果;CCK-8法检测KPC1对肝癌细胞系增殖能力的影响;Transwell法验证KPC1对肝癌细胞系迁移能力的影响;WB法检测扰动KPC1后p105蛋白表达水平的影响;Log-rank检验比较KPC1高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异.结果 过表达KPC1可显著抑制Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力;而敲低KPC1显著促进Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力.过表达KPC1抑制p105的表达水平、提升p50的表达水平;而敲低KPC1则促进p105的表达水平、抑制p50的表达水平.临床相关性分析显示KPC1在肝癌癌组织中下调表达,且与肝癌患者的不良预后显著相关.结论 KPC1通过抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力而发挥抑癌基因的功能.

作者:周光明;金亮;高成明;曹鹏博;周钢桥

来源:军事医学 2018 年 42卷 4期

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作者:
周光明;金亮;高成明;曹鹏博;周钢桥
来源:
军事医学 2018 年 42卷 4期
标签:
肝肿瘤 KPC1 细胞增殖 细胞迁移 细胞运动 RNA,小分子干扰 泛素化
目的 探讨Kip1泛素化促进复合体蛋白1(KPC1)对肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721细胞增殖与迁移能力的影响以及可能的分子机制.方法 通过慢病毒包装的方法将KPC1过表达重组质粒转染进肝癌细胞系Bel-7402和SMMC-7721,筛选得到稳定过表达KPC1的肝癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬转敲低肝癌细胞系中的KPC1;蛋白质免疫印迹法(WB)检测肝癌细胞系中KPC1蛋白的表达水平,验证过表达和敲低KPC1的效果;CCK-8法检测KPC1对肝癌细胞系增殖能力的影响;Transwell法验证KPC1对肝癌细胞系迁移能力的影响;WB法检测扰动KPC1后p105蛋白表达水平的影响;Log-rank检验比较KPC1高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异.结果 过表达KPC1可显著抑制Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力;而敲低KPC1显著促进Bel-7402和SMMC-7721细胞的增殖和迁移能力.过表达KPC1抑制p105的表达水平、提升p50的表达水平;而敲低KPC1则促进p105的表达水平、抑制p50的表达水平.临床相关性分析显示KPC1在肝癌癌组织中下调表达,且与肝癌患者的不良预后显著相关.结论 KPC1通过抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力而发挥抑癌基因的功能.