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目的 筛选有效抑制磷酸甘油酸激酶1(PGK1)基因的短发夹核糖核酸(shRNA)序列.方法 针对PGK1的不同基因区域设计4个shRNA序列,应用LipofectamineTM 2000方法转染至胶质瘤细胞株U251细胞,荧光显微镜下观察shRNA的转染效率.采用RT-PCR方法检测PGK1的mRNA表达,Western blot方法检测PGK1的蛋白表达.结果 针对PGK1-homo-441位点的shRNA4(5'-GCAAGGATGTTCTGTTCTTGA-3')能更有效地抑制PGK1的mRNA及蛋白表达.结论 shRNA4是能有效抑制PGK1表达的序列,可用于PGK1的功能研究.

作者:丁浩;成宜军;肖红;阎华;张锐;章文斌;张岩松;邹元杰;刘宏毅

来源:江苏医药 2013 年 39卷 16期

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作者:
丁浩;成宜军;肖红;阎华;张锐;章文斌;张岩松;邹元杰;刘宏毅
来源:
江苏医药 2013 年 39卷 16期
标签:
短发夹核糖核酸 磷酸甘油酸激酶1基因 Short hairpin RNA PGK1 gene
目的 筛选有效抑制磷酸甘油酸激酶1(PGK1)基因的短发夹核糖核酸(shRNA)序列.方法 针对PGK1的不同基因区域设计4个shRNA序列,应用LipofectamineTM 2000方法转染至胶质瘤细胞株U251细胞,荧光显微镜下观察shRNA的转染效率.采用RT-PCR方法检测PGK1的mRNA表达,Western blot方法检测PGK1的蛋白表达.结果 针对PGK1-homo-441位点的shRNA4(5'-GCAAGGATGTTCTGTTCTTGA-3')能更有效地抑制PGK1的mRNA及蛋白表达.结论 shRNA4是能有效抑制PGK1表达的序列,可用于PGK1的功能研究.