目的 建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞系,探讨Wnt/β-catenin信号通路在乳腺癌拉帕替尼耐药中的作用.方法 使用拉帕替尼逐步增加剂量法诱导入乳腺癌BT474细胞,建立其多药耐药细胞株rBT474; MTT细胞毒实验检测拉帕替尼对BT474和rBT474细胞的生长抑制作用；基因转染小分子双链siRNA干扰rBT474细胞β-eatenin基因的表达;Westernblot检测目的蛋白的表达；PI和Annexin V-FITC双染流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果 成功建立了人乳腺癌BT474拉帕替尼耐药细胞株rBT474.拉帕替尼对BT474和rBT474细胞的IC50值分别为(5.41±0.42)μmol/L和(38.57±2.86) μmol/L(P＜0.01).rBT474细胞中β-catenin蛋白的表达显著高于BT474细胞.靶向小分子双链siRNA特异性的下调了rBT474细胞中β-catenin的表达.I0μmol/L拉帕替尼作用rBT474细胞48h后,特异性RNA干扰组细胞凋亡率明显高于对照组和阴性RNA干扰对照组[(28.84±4.37)％ vs.(11.02±2.26)％和(12.45±2.64) ％](P＜0.01).结论 拉帕替尼耐药细胞rBT474出现了Wnt/β-catenin信号通路的激活,小分子干扰RNA下调β-catenin基因表达可显著提高拉帕替尼对rBT474细胞的致凋亡作用.
作者：赵立民
来源：江苏医药 2013 年 39卷 19期
