目的 探讨连接蛋白43(Cx43)基因条件敲除小鼠(Cx43KO小鼠)的繁殖、基因型鉴定及其导致的骨髓增生异常机制.方法 将引进的2对转基因小鼠Cx43loxP/loxP和Lyz-Cre/+进行交配饲养和繁殖,选取子一代雌性Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+与雄性Cx43loxP/loxP合笼交配,获得Cx43loxP/loxP_Lyz-Cre/+小鼠(即Cx43KO小鼠).提取鼠尾组织基因组DNA,采用PCR方法鉴定小鼠基因型,RT-PCR方法进一步验证Cx43KO小鼠的正确性.结果 Cx43KO小鼠繁殖成功,成功获得Cx43loxP/loxP_Lyz-Cre/+、Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+、Cx43loxP/loxP、Cx43loxP/-四种基因型小鼠;其繁殖结果符合孟德尔遗传定律.Cx43KO小鼠骨髓、肝、脾Cx43 mRNA的表达均较杂合型小鼠下降(P<0.05).结论 PCR方法可准确鉴定子鼠的基因型.雌性Cx43loxP/-_Lyz-Cre/+小鼠与雄性Cx43loxP/loxP小鼠交配是获得Cx43KO小鼠的有效途径.
作者:徐燕霞;周东明;傅晋翔
来源:江苏医药 2017 年 43卷 11期