目的 通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达,观察其对平滑肌细胞增殖的影响.方法 应用阳离子脂质体转染的方法,将化学合成的特异性378siRNA转染平滑肌细胞设为特异性siRNA组,并以转染非特异性siRNA和空白作为对照,半定量RT-PCR法分析转染不同时间(24、48、72、96h)细胞Cx43 mRNA表达水平的变化;同时噻唑蓝(MTT)比色法检测平滑肌细胞增殖,观察转染不同浓度(50、100、150、200nmol/L)378siRNA对细胞增殖的影响.结果 半定量RT-PCR结果显示与非特异性siRNA组及空白对照组相比,转染特异性378siRNA后Cx43 mRNA表达水平显著地下调并呈时间依赖性特点.MTT结果显示与空白对照组相比,转染低浓度(50nmol/L)378siRNA早期(24、48h)OD值开始降低,但差异无统计学意义(P>0.05),随着特异性siRNA 浓度的升高,OD值显著降低(P<0.05).200nmol/L 378siRNA转染72、96h对细胞的增殖抑制率分别为32.51
作者:冯九庚;封荣华;段剑;蒋丽萍;洪涛
来源:江西医学院学报 2008 年 48卷 2期