目的:探讨表达谱芯片初步分析 microRNA差异表达是否参与调控颈椎软骨终板退变。方法选择25例颈椎软骨终板退变、需要行手术治疗的患者为病例组,15例无椎间盘软骨终板退变患者为对照组。选取病例组2例和对照组2例标本进行microRNA芯片差异表达分析。然后采用miRCURYTM LNA 18.0表达谱芯片进行原位杂交,由 Axon GenePix 4000B microarray扫描仪采集芯片荧光值。芯片结果经病例组15例和对照组15例标本进行 Real-time PCR和Western blot验证。结果病例组发现22个上调和19个下调 microRNA。Real-time PCR验证:病例组miR-140-5P表达量低于对照组的3倍、miR-140-5P的靶基因 Adamts-5和 Dnpep的表达量分别高于对照组的3倍和3.5倍(均P<0.05)。miR-140-5P 与 Adamts-5和 Dnpep 的 miRNA表达呈负相关(r=-0.84、-0.76,均P<0.05)。Western blot结果示:病例组软骨终板 Adamts-5和 Dnpep的蛋白表达分别为0.66±0.46和0.57±0.32,均高于对照组软骨终板的0.22±0.06和0.26±0.08(均P<0.05)。结论本研究首次报道了 miR-140-5P参与调控颈椎软骨终板退变。进一步研究miR-140-5P不仅有利于揭示软骨终板退变的分子生物学机制,而且其日后也可能成为治疗椎间盘退变的有效靶工具。
作者:程细高;贾惊宇;吴添龙;李健;张磊磊;殷明
来源:南昌大学学报(医学版) 2014 年 5期