目的:观察肿瘤抑制基因 PTEN 对人气道平滑肌细胞(HASMCs)迁移和增殖的影响机制。方法用重组PTEN 腺病毒转染体外培养的 HASMCs(Ad-PTEN 组),并与携带绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒空载体(Ad-GFP组)和空白对照(MOCK)组对比,采用 MTS 测定细胞增殖、Transwell 法观察细胞迁移、共聚焦显微镜观测细胞骨架的变化、免疫印迹法检测 PTEN、p-Akt、Akt、p-FAK、FAK 蛋白的表达。结果Ad-PTEN 组的吸光度(A)值和每单位面积迁移的细胞数显著低于 Ad-GFP 及 MOCK 组(均 P <0.05),Ad-GFP 和 MOCK 两对照组间差异无统计学意义(P >0.05),提示过表达 PTEN 基因能抑制 HASMCs 的增殖和迁移的作用。Ad-PTEN 组细胞轮廓变细,伪足及应力纤维明显变少,而 Ad-GFP、MOCK 组细胞有少量短而细的应力纤维,很少丝状伪足形成。与 Ad-GFP 及 MOCK 组比较,Ad-PTEN 组 p-Akt 表达水平和 FAK 蛋白的磷酸化水平显著下调(均 P <0.05),Ad-GFP及 MOCK 两对照组间差异无统计学意义(P >0.05),说明过表达 PTEN 能下调 Akt 蛋白和 FAK 蛋白的磷酸化水平。结论过表达 PTEN 可能通过下调 p-Akt 及 p-FAK 的表达,抑制 HASMCs 的增殖和迁移,参与哮喘气道重塑的调控。
作者:蓝海兵;罗雅玲;赖文岩;龚园其
来源:南昌大学学报(医学版) 2015 年 3期