目的:评估膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者关节滑液双向凝胶电泳几种预处理方案的优劣。方法收集2012年1月-2012年3月在解放军总医院行关节镜诊治KOA患者关节滑液样本8例,混合均匀并等分为36份。9份不进行任何处理,9份用透明质酸酶处理,9份采用亲和层析法除高丰度蛋白,9份用透明质酸酶联合亲和层析法进行处理,对36份滑液进行双向凝胶电泳,比较未处理组与处理组以及处理组之间电泳图谱的差异并确定最佳预处理方案,采用最佳方案对12例不同严重程度KOA患者关节滑液进行预处理,分析寻找差异蛋白点并用质谱定性。结果采用透明质酸酶联合亲和层析法对样本进行预处理后获得的电泳图谱质量最佳。用此法进行预处理的12例不同严重程度KOA患者滑液,鉴定出了载脂蛋白、纤维蛋白原D片段等与关节疾病相关的蛋白因子。结论透明质酸酶联合亲和层析预处理方案能获得高质量的电泳图谱,可作为蛋白质组学研究中优先选取的样本预处理方案。
作者:廖伟雄;李众利;王杰;王鸿丽;傅仰木;白晓伟
来源:解放军医学院学报 2013 年 9期