目的：构建结核分枝杆菌 H37Rv 的 ligC 原核表达载体，并进行表达纯化及酶学测定。方法以结核分枝杆菌 H37Rv 基因组 DNA 为模板，PCR 法扩增 ligC 基因，构建 pQE-30-ligC 重组质粒，在表达宿主菌 E．coli M15中诱导表达蛋白，经 Ni2＋-NTA 亲和层析柱纯化，最后 ATP 酶活性检测。结果成功构建了 ligC 原核表达载体 pQE-30-ligC，并能在宿主菌 E．coli M15中表达，纯化后具有 ATP 酶活性。结论LigC 基因克隆到原核宿主菌中能进行表达纯化，纯化后的蛋白具有 ATP 酶生物学活性。
作者：林雅宁；徐忠玉
来源：检验医学与临床 2014 年 z1期
