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目的:探讨改进的亚硫酸氢盐测序法在上皮钙黏蛋白甲基化检测中的可行性。方法提取雄性F344大鼠肾脏组织基因组 DNA ,亚硫酸氢盐化学转化,通过 PCR 扩增上皮钙黏蛋白基因启动子区特定的序列,以蓝白克隆斑筛选和测序。结果雄性 F344大鼠肾脏上皮钙黏蛋白基因启动子区 CpG 岛的26个 CpG 位点均未发生甲基化。结论改进后亚硫酸氢盐测序法能明显减少非特异性扩增,提高 PCR 效率,更适于基因甲基化状态的检测。

作者:廖静;鲁文清;刘渠;谢显清;李小峰

来源:检验医学与临床 2016 年 13卷 6期

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作者:
廖静;鲁文清;刘渠;谢显清;李小峰
来源:
检验医学与临床 2016 年 13卷 6期
标签:
DNA 甲基化 大鼠 上皮钙黏蛋白 肾脏 DNA methylation rats E-cadherin kidney
目的:探讨改进的亚硫酸氢盐测序法在上皮钙黏蛋白甲基化检测中的可行性。方法提取雄性F344大鼠肾脏组织基因组 DNA ,亚硫酸氢盐化学转化,通过 PCR 扩增上皮钙黏蛋白基因启动子区特定的序列,以蓝白克隆斑筛选和测序。结果雄性 F344大鼠肾脏上皮钙黏蛋白基因启动子区 CpG 岛的26个 CpG 位点均未发生甲基化。结论改进后亚硫酸氢盐测序法能明显减少非特异性扩增,提高 PCR 效率,更适于基因甲基化状态的检测。