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目的 探讨分选肺癌细胞株侧群细胞(SP细胞)及鉴定干细胞特性.方法 选择肺癌细胞株SK-MES-1和NCI-H460,通过流式细胞仪对SP与非SP(NSP)细胞进行分选,然后进行培养并且传代,选择的培养基分别为正常情况及干细胞培养基当中,对细胞分化能力与表型进行观察;通过电镜对细胞进行观察,了解其超微结构;利用免疫荧光对干细胞标志物CD44的表达进行检测;利用CCK-8法对细胞增殖能力进行检测,采用平板克隆 、裸鼠成瘤实验及Transwell侵袭实验对细胞进行了解,明确其恶性程度.结果 初次分选NCI-H460和SK-MES-1细胞株NSP和SP细胞百分比,以及再纯化NSP和SP细胞百分比的比较,差异无统计学意义(P>0.05).在干细胞培养基中,NSP和SP细胞都无法形成干细胞球,但具有较快的增殖速度.NSP细胞表现出的是接触抑制的单层生长,SP细胞表现出的是集聚生长.当培养到第5代时,SP细胞与NSP细胞分别表现出的是不显著的变化及混杂表型.电镜下SP细胞核质比较高,NSP细胞核质比低.NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞能够对CD44高表达,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).对比NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞与NSP细的细胞增殖活力,在第2、5和7天时的数据情况,前者明显比后者高,差异有统计学意义(P<0.05).NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞克隆形成率和平

作者:度蔚;陈昭颖

来源:检验医学与临床 2018 年 15卷 23期

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作者:
度蔚;陈昭颖
来源:
检验医学与临床 2018 年 15卷 23期
标签:
肺癌细胞 侧群细胞 肿瘤干细胞
目的 探讨分选肺癌细胞株侧群细胞(SP细胞)及鉴定干细胞特性.方法 选择肺癌细胞株SK-MES-1和NCI-H460,通过流式细胞仪对SP与非SP(NSP)细胞进行分选,然后进行培养并且传代,选择的培养基分别为正常情况及干细胞培养基当中,对细胞分化能力与表型进行观察;通过电镜对细胞进行观察,了解其超微结构;利用免疫荧光对干细胞标志物CD44的表达进行检测;利用CCK-8法对细胞增殖能力进行检测,采用平板克隆 、裸鼠成瘤实验及Transwell侵袭实验对细胞进行了解,明确其恶性程度.结果 初次分选NCI-H460和SK-MES-1细胞株NSP和SP细胞百分比,以及再纯化NSP和SP细胞百分比的比较,差异无统计学意义(P>0.05).在干细胞培养基中,NSP和SP细胞都无法形成干细胞球,但具有较快的增殖速度.NSP细胞表现出的是接触抑制的单层生长,SP细胞表现出的是集聚生长.当培养到第5代时,SP细胞与NSP细胞分别表现出的是不显著的变化及混杂表型.电镜下SP细胞核质比较高,NSP细胞核质比低.NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞能够对CD44高表达,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05).对比NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞与NSP细的细胞增殖活力,在第2、5和7天时的数据情况,前者明显比后者高,差异有统计学意义(P<0.05).NCI-H460和SK-MES-1细胞株SP细胞克隆形成率和平