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为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法.结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRv蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带.本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考.

作者:孟庆玲;才学鹏;倪伟;任艳;李贞;刘佳旭;乔军

来源:基因组学与应用生物学 2010 年 29卷 4期

知识库介绍

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作者:
孟庆玲;才学鹏;倪伟;任艳;李贞;刘佳旭;乔军
来源:
基因组学与应用生物学 2010 年 29卷 4期
标签:
小反刍兽疫 重组蛋白抗原 间接ELISA 竞争ELISA
为了建立一种快速、特异、敏感的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)血清学检测方法,本研究将PPRV血凝蛋白(H)和核蛋白(N)克隆至pET28a(+)载体进行诱导表达,并将2种蛋白Ni柱纯化后包被ELISA反应板,建立起检测PPRV特异性抗体的间接ELISA法.结果表明在E.coli BL21(DE3)中表达出2种PPRv蛋白,将2种重组蛋白纯化后按照1:1比例混合,制备PPRV鸡尾酒抗原,成功建立了特异性强、敏感性高的PPRV间接ELISA法;最后用建立的方法对新疆伊犁、塔城、阿勒泰和喀什边境地区采集的325份山羊、789份绵羊和132份牛血清进行了抗体检测,检测结果显示均为阴性,提示在我国新疆边境地区反刍动物尚未发生PPRV感染,但需要及时进行免疫接种以建立预防PPRV从国外传入的免疫带.本研究建立的PPRV间接ELISA法为该病毒的检测提供基础,也为该病的科学防控提供参考.