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目的 观察脂多糖(LPS)处理肠上皮细胞对缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)及下游炎症相关靶基因环氧化酶-2 (COX-2)表达的影响,探讨大黄素干预的可能作用靶点.方法 建立LPS处理人肠上皮细胞的体外实验模型.①用Western blot检测LPS不同剂量和不同时间处理组的HIF-1α和COX-2蛋白表达的变化趋势;检测LPS和不同剂量大黄素共同干预组的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65蛋白表达的变化趋势.②用PCR检测LPS处理组与LPS和大黄素共同干预组HIF-1α的mRNA水平.③用MTT法检测大黄素对肠上皮细胞增殖情况的影响.数据采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 ①LPS可引起HIF-1α表达升高,且有时间和剂量效应关系.随LPS质量浓度的增加,HIF-1α的表达量先增高后降低,在质量浓度为10-3 mg/mL时HIF-1α表达量最高(P<0.05);HIF-1α表达首先在0.5h达峰值,而后到4h下降至最低,最后又增高(P<0.05).COX-2蛋白表达变化趋势与HIF-1α基本一致(P<0.05).大黄素可抑制LPS诱导的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65的表达,并有明显量效关系(P<0.05).②PCR检测LPS刺激后HIF-1α的mRNA水平增高,而大黄素抑制其增高.③MTT法检测不同浓度的大黄素(0μmol/L、20 μmol/L、40μmol/L、

作者:祁蕾;傅强;崔乃强;张国倩

来源:中华急诊医学杂志 2014 年 23卷 4期

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作者:
祁蕾;傅强;崔乃强;张国倩
来源:
中华急诊医学杂志 2014 年 23卷 4期
标签:
脂多糖 缺氧诱导因子-1α 肠上皮细胞 大黄素 环氧化酶-2 LPS HIF-1α Intestinal epithelial cell Emodin COX-2
目的 观察脂多糖(LPS)处理肠上皮细胞对缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)及下游炎症相关靶基因环氧化酶-2 (COX-2)表达的影响,探讨大黄素干预的可能作用靶点.方法 建立LPS处理人肠上皮细胞的体外实验模型.①用Western blot检测LPS不同剂量和不同时间处理组的HIF-1α和COX-2蛋白表达的变化趋势;检测LPS和不同剂量大黄素共同干预组的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65蛋白表达的变化趋势.②用PCR检测LPS处理组与LPS和大黄素共同干预组HIF-1α的mRNA水平.③用MTT法检测大黄素对肠上皮细胞增殖情况的影响.数据采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果 ①LPS可引起HIF-1α表达升高,且有时间和剂量效应关系.随LPS质量浓度的增加,HIF-1α的表达量先增高后降低,在质量浓度为10-3 mg/mL时HIF-1α表达量最高(P<0.05);HIF-1α表达首先在0.5h达峰值,而后到4h下降至最低,最后又增高(P<0.05).COX-2蛋白表达变化趋势与HIF-1α基本一致(P<0.05).大黄素可抑制LPS诱导的HIF-1α、COX-2、Phospho-IκB-α和Phospho-NF-κB p65的表达,并有明显量效关系(P<0.05).②PCR检测LPS刺激后HIF-1α的mRNA水平增高,而大黄素抑制其增高.③MTT法检测不同浓度的大黄素(0μmol/L、20 μmol/L、40μmol/L、