目的 观察脓毒症小鼠脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及其Notch-1、NF-κBmRNA及其蛋白表达的动态变化,通过构建miR-34a过表达慢病毒载体及包装,并进行鞘内注射,研究其调控Notch-1/NF-κB信号通路对脓毒症小鼠脑组织各指标的影响.方法 将清洁级小鼠54只随机(随机数字法)分为假手术组(sham组,n=9,仅行腹腔开关术),模型组(CLP组,n=15,采用盲肠结扎穿孔模型),阴性对照组[NC组,n=15,鞘内注射阴性对照慢病毒(滴度为5×108 TU/mL)5μL/d,共3d,第7天行CLP术],干预组[n=15,鞘内注射miR-34a慢病毒(滴度为5×108 TU/mL)5μL共3d,第7天行CLP术],各组小鼠均于术后24h,麻醉后处死,留取脑组织标本.观察小鼠行为学变化,术后24 h进行神经功能评分;用EHSA法分别测定脑组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10的水平;用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR)法测定脑组织Notch-1、NF-κB mRNA表达;用Western Blot法测定脑组织Notch-1、NF-κB蛋白表达;并观察脑组织病理学改变.结果 与sham组比较,CLP组在术后24h点神经功能评分、TNF-α、IL-6水平、NF-κB mRNA及其蛋白表达(P<0.01)、IL-1β显著升高(P<0.05),IL-10水平、Notch-1 mRNA及其蛋白表达显著下降(P<0.01),NC组在术后24h点神经功能评分、TNF-α、
作者:葛赟;黄曼;颜成敏;陈芬;马岳峰
来源:中华急诊医学杂志 2017 年 26卷 1期