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目的 利用microRNA(miRNA)表达谱芯片探索大黄素对脓毒症小鼠肠道miRNA表达的调控作用.方法 通过盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型,42只c57小鼠随机(随机数字法)分为三组:假手术组(Sham组),脓毒症模型组(Sepsis组)和大黄素干预组(Emodin组),每组各14只.Emodin组术前0.5 h以及术后每12h给予大黄素(40 mg/kg)腹腔注射治疗一次.所有小鼠均于手术后48 h处死并取材.采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-d,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)的水平,HE染色法观察肠组织损伤程度.应用miRNA芯片检测小鼠回肠组织miRNA表达谱,筛选出差异表达的miRNA,并用qRT-PCR对芯片结果进行验证.最后使用生物信息学方法对差异表达明显的miRNA进行靶基因预测并做进一步的GO和Pathway分析.各组间采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,方差不齐时采用Mann-Whitney U检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与Sepsis组相比,Emodin组小鼠镜下肠组织病理损伤程度减轻,血清TNF-α、IL-6和I-FABP水平出现明显降低(P<0.05),miRNA芯片分析获得23个差异表达的miRNA,其中17个上调,6个下调.实时qRT-PCR验证mmu-miR-183-5p

作者:雍陟;江智军;章美元;范志文;孙维兰;汤彦

来源:中华急诊医学杂志 2019 年 28卷 11期

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作者:
雍陟;江智军;章美元;范志文;孙维兰;汤彦
来源:
中华急诊医学杂志 2019 年 28卷 11期
标签:
大黄素 脓毒症 肠黏膜 microRNA 表达谱 生物信息学 Emodin Sepsis Intestinal mucosa MicroRNA Expression profiles Bioinformatics
目的 利用microRNA(miRNA)表达谱芯片探索大黄素对脓毒症小鼠肠道miRNA表达的调控作用.方法 通过盲肠结扎穿孔法建立脓毒症模型,42只c57小鼠随机(随机数字法)分为三组:假手术组(Sham组),脓毒症模型组(Sepsis组)和大黄素干预组(Emodin组),每组各14只.Emodin组术前0.5 h以及术后每12h给予大黄素(40 mg/kg)腹腔注射治疗一次.所有小鼠均于手术后48 h处死并取材.采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-d,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)以及肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein,I-FABP)的水平,HE染色法观察肠组织损伤程度.应用miRNA芯片检测小鼠回肠组织miRNA表达谱,筛选出差异表达的miRNA,并用qRT-PCR对芯片结果进行验证.最后使用生物信息学方法对差异表达明显的miRNA进行靶基因预测并做进一步的GO和Pathway分析.各组间采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验,方差不齐时采用Mann-Whitney U检验,以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与Sepsis组相比,Emodin组小鼠镜下肠组织病理损伤程度减轻,血清TNF-α、IL-6和I-FABP水平出现明显降低(P<0.05),miRNA芯片分析获得23个差异表达的miRNA,其中17个上调,6个下调.实时qRT-PCR验证mmu-miR-183-5p