目的:探讨抑制Wnt/β-catenin信号通路对百草枯（paraquat, PQ）诱导的人胚肺成纤维细胞（MRC-5）转分化的影响及相关分子机制。方法:将MRC-5细胞分为三组，对照组（Control组）：不加药物处理；PQ组：以50 μmol/L的PQ刺激MRC-5细胞72 h诱导建立转分化模型；PQ+DKK1组：以50 μmol/L的PQ和10 ng/mL的DKK1同时处理细胞72 h。收集细胞，采用细胞免疫荧光和Western Blot分别检测三组细胞转分化标记物α-SMA、Vimentin和Collagen I的表达水平；同时，应用Western Blot、细胞免疫荧光和实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测转分化过程中Wnt通路相关信号分子β-catenin、Cyclin D1和WISP1的表达变化情况；进一步采用Wnt/β-catenin通路抑制剂Dickkopf-1（DKK1）阻断该信号途径，Western Blot检测β-catenin、Cyclin D1和WISP1表达变化情况，以验证干预效果并分析干扰Wnt/β-catenin信号传递对转分化标记分子α-SMA、Vimentin和Collagen I表达的影响。结果:处理72 h后，与对照组细胞相比，PQ组MRC-5细胞α-SMA、Vimentin和Collagen I的表达水平均显著增加（ P<0.05）；同时，在PQ诱导MRC-5转分化过程中β-catenin、Cyclin D1和WISP1表达水平显著上调（ P<0.05）；采用DKK1干扰Wnt/β-catenin信号通路

作者：王蒙蒙；杨志洲；任艺；李亮；曹丽萍；孙兆瑞

来源：中华急诊医学杂志 2022 年 31卷 3期